■ 基本信息
啟動子: | CMV |
復制子: | pUC |
終止子: | WPRE，3’LTR |
質粒分類: | 病毒系列，慢病毒克隆載體 |
質粒大小: | 8204bp |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | Stbl3 |
培養(yǎng)條件: | 37度 |
表達宿主: | 哺乳細胞 |
誘導方式: | 無須誘導，瞬時表達 |
5'測序引物: | CMV-F：CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG |
3'測序引物: | 根據(jù)序列設計引物 |
■ 質粒屬性
質粒宿主: | 哺乳細胞,慢病毒 |
質粒用途: | 蛋白表達 |
片段類型: | ORF |
片段物種: | 空載體 |
原核抗性: | Amp |
真核抗性: |
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熒光標記: | 綠色
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■ 質粒簡介
plvx-ires-zsgreen1是HIV-1，慢病毒表達載體，讓你在幾乎任何哺乳動物細胞類型的興趣和zsgreen1蛋白同時表達，包括原代細胞。zsgreen1是人類密碼子優(yōu)化的變種的珊瑚礁Zoanthus屬綠色熒光蛋白，ZsGreen。向量表示的兩種蛋白雙順反子mRNA的轉錄，使zsgreen1作為轉導效率的一個指標，用流式細胞儀選擇標記。
雙順反子的轉錄表達的組成性激活人類巨細胞病毒立即早期啟動子驅動（CMV）位于上游的MCS。腦心肌炎病毒（EMCV）內部核糖體進入位點（IRES），位于MCS和zsgreen1之間，有利于在IRES / zsgreen1結內部起始位點zsgreen1帽獨立的翻譯。
plvx-ires-zsgreen1包含所有用于生產的必要的復制能力的慢病毒病毒處理的元素，以及元素來提高病毒滴度，外源基因的表達水平，和整體的向量函數(shù)。土撥鼠肝炎病毒轉錄后調節(jié)元件（WPRE）促進RNA處理事件和增強病毒RNA核出口，導致增加病毒滴度包裝細胞。此外，載體包括Rev應答元件（RRE），從而進一步增加病毒滴度提高拼接的病毒RNA轉運出細胞核。最后，plvx-ires-zsgreen1還包含一個中央聚嘌呤道/中央終止序列（CPPT / CTS）。在靶細胞感染過程中，該元素創(chuàng)建一個中央的DNA瓣，增加了病毒基因組的核導入，從而在改進的矢量集成和更有效的轉導。載體還包含一個復制市局起源和大腸桿菌氨芐青霉素抗性基因（Ampr）在細菌繁殖和選擇。
■ 質粒圖譜
■ 質粒序列
質粒序列請下載：
ZK758pLVX-IRES-ZsGreen1慢病毒表達質粒.txt
