■ 基本信息
啟動(dòng)子: | pR/pL |
復(fù)制子: | pUC |
質(zhì)粒分類: | 大腸桿菌載體；蛋白表達(dá)質(zhì)粒 |
質(zhì)粒大小: | 3666bp |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | DH5α |
培養(yǎng)條件: | 30℃ |
表達(dá)宿主: | 大腸桿菌 |
誘導(dǎo)方式: | 42度 |
5'測(cè)序引物: | pBV220-F: 5'-AAGAAGGGCAGCATTCAAAG-3 ' |
3'測(cè)序引物: | pBV220-R: 5'-CTGCGTTCTGATTTAATCTG-3 ' |
備注: | 溫控表達(dá)質(zhì)粒 |
■ 質(zhì)粒屬性
質(zhì)粒宿主: | 大腸桿菌 |
質(zhì)粒用途: | 蛋白表達(dá) |
片段類型: | ORF |
片段物種: | 空載體 |
原核抗性: | Amp |
真核抗性: |
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熒光標(biāo)記: |
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■ 質(zhì)粒簡(jiǎn)介
pBV220質(zhì)粒的SD sequence（用于結(jié)合原核生物核糖體的序列）后緊跟多克隆酶切位點(diǎn)，便于插入帶起始ATG的外源基因，可表達(dá)非融合蛋白。
載體含有強(qiáng)的轉(zhuǎn)錄終止子可 防止出現(xiàn)"通讀"現(xiàn)象，有利于質(zhì)粒-宿主系統(tǒng)的穩(wěn)定。
載體pBV220為3.7Kb，有利于增加其拷貝數(shù)及容量。pBV220含有PL啟動(dòng)子和編碼對(duì)該啟動(dòng)子具有抑制作用而又對(duì)溫度敏感的cI蛋白基因cIts857調(diào)控基因cI，因此可用溫度對(duì)插入其中的外源基因的轉(zhuǎn)錄進(jìn)行調(diào)控。
溫控型原核表達(dá)載體，高拷貝數(shù)，大容量，強(qiáng)啟動(dòng)子，強(qiáng)轉(zhuǎn)錄終止子，可在任何受體菌中誘導(dǎo)表達(dá)。
pBV220載體是λPL/PR-cI857溫度敏感系統(tǒng)表達(dá)載體，能夠在42 ℃表達(dá)非融合的目的蛋白。
在利用pBV220載體進(jìn)行質(zhì)粒構(gòu)建的時(shí)候，需要加入ATG起始密碼子。
PBV220質(zhì)粒屬于溫度誘導(dǎo)表達(dá)型，培養(yǎng)溫度為30 ℃，誘導(dǎo)溫度為42 ℃。
Ampr, 氨芐抗性基因;
ori, 質(zhì)粒復(fù)制起點(diǎn);
cIts857, lambda 噬菌體表達(dá)抑制基因，但是在熱誘導(dǎo)條件下能夠表達(dá)目的基因;
PRPL, 來自于lambda 噬菌體的串聯(lián)的PR和PL啟動(dòng)子，保證基因的高水平表達(dá);
SD, Shine-Dalgarno序列;
rrnB, 核糖體rrnB基因，是基因轉(zhuǎn)錄終止信號(hào);
pBV220載體是我國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒研究所自行構(gòu)建的大腸桿菌溫控表達(dá)載體,目前仍在廣泛使用。
質(zhì)粒只保證關(guān)鍵序列正確，不保證表達(dá)效果。
■ 質(zhì)粒圖譜
■ 質(zhì)粒序列
質(zhì)粒序列請(qǐng)下載：
ZK326pBV220大腸表達(dá)質(zhì)粒.txt
