■ 產(chǎn)品介紹
EGY48菌株是Clontech公司開發(fā)的LexA 系統(tǒng)酵母雙雜實(shí)驗(yàn)用菌株，MATa型，可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進(jìn)行蛋白互作驗(yàn)證或篩庫試驗(yàn)；Transformation marker為: his3, trp1, ura3，報(bào)告基因?yàn)椋篖EU2；報(bào)告基因UAS（上游激活序列）來源于LexA op(x6)，只有當(dāng)Bait和Prey互作時(shí)才能啟動(dòng)LEU2表達(dá) 。EGY48-LexA酵母雙雜系統(tǒng)系統(tǒng)需要三種質(zhì)粒配套使用：pLexA、pB42AD、p8op-LacZ。質(zhì)粒pLexA的篩選標(biāo)志為HIS3，用于表達(dá)DNA-BD(來自原核的202個(gè)氨基酸殘基組成的LexA蛋白)與目標(biāo)蛋白(Bait)的融合蛋白；質(zhì)粒pB42AD的篩選標(biāo)志為TRP1，用于表達(dá)AD(來自皰疹病毒的88個(gè)氨基酸殘基組成的B42AD蛋白)與目標(biāo)蛋白（Prey）的融合蛋白；報(bào)告質(zhì)粒p8op-LacZ的篩選標(biāo)志為URA3，報(bào)告基因?yàn)長(zhǎng)acZ，報(bào)告基因UAS來源于LexA op(x8) ，只有當(dāng)Bait和Prey互作時(shí)才能啟動(dòng)LacZ表達(dá)。EGY48菌株可用YPDA在28℃有氧的條件下培養(yǎng),然后用30%甘油保藏菌種。 |
基因型： | MATα, ura3, his3, trp1, LexAop (x6)-LEU2 |
■ 基本信息
培養(yǎng)基: | YPD/YPDA |
菌株類別: | 酵母菌 |
培養(yǎng)條件: | 28℃，有氧，YPD/YPDA |
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化: | 化轉(zhuǎn)/電轉(zhuǎn) |
保存方式: | 30%甘油，-80℃ |
基本應(yīng)用: | 用于酵母雙雜交 |
■ 使用方法
收到菌液及時(shí)四區(qū)劃線活化，挑取單克隆在YPD中培養(yǎng)到生長(zhǎng)對(duì)數(shù)中后期加入終濃度30%無菌甘油保種，分裝置于-80℃保存，避免反復(fù)化凍。建議超凈臺(tái)內(nèi)劃線涂板，避免雜菌污染。
■ 注意事項(xiàng)
1. 酵母菌在YPD培養(yǎng)基上會(huì)變粉，是正?，F(xiàn)象，可以由此特性鑒別是否為酵母菌。
2. 酵母菌種化凍1-2次活性下降，不建議直接長(zhǎng)期保存。
3. 活化保種的種管建議分裝保存，反復(fù)凍融菌株活力下降。
4. 本產(chǎn)品僅可用于實(shí)驗(yàn)室研究，不能用于動(dòng)物，人體以及作為食品添加劑等用途。
5. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
