■ 產(chǎn)品介紹
KM71是畢赤酵母菌株，屬于真核細(xì)胞。一般的針對(duì)原核生物的抗生素例如卡那和氨芐對(duì)酵母是無(wú)效的，因此為了防止大腸桿菌等原核生物對(duì)酵母培養(yǎng)菌株污染，往往會(huì)在培養(yǎng)基中加入一些氨芐和卡那霉素的抗生素，來(lái)抑制細(xì)菌菌的污染和生長(zhǎng)。KM71畢赤酵母自身表型為MutS，所以KM71轉(zhuǎn)化株只能產(chǎn)生出His+MutS菌株。畢赤酵母適宜的生長(zhǎng)溫度是28至30度，一般可以設(shè)置在30℃培養(yǎng)，溫度超過(guò)32℃對(duì)蛋白的表達(dá)是有害的，并可能導(dǎo)致細(xì)胞的死亡。 KM71畢赤酵母是是組氨酸缺陷型（His4基因型），如果表達(dá)載體上攜帶有組氨酸基因，可補(bǔ)償宿主菌的組氨酸缺陷，因此可以在不含組氨酸的培養(yǎng)基上篩選轉(zhuǎn)化子。這些受體菌自發(fā)突變?yōu)榻M氨酸野生型的概率一般低于10-8。 KM71畢赤酵母可以在YPD培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，或者在補(bǔ)充有組氨酸的minimal media中生長(zhǎng)，但是無(wú)法在單獨(dú)的minimal media培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。用30%的甘油與培養(yǎng)物混合保藏菌種，質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的方法：電轉(zhuǎn)化。 |
基因型： | arg4 his4 aox1::ARG4 |
■ 基本信息
培養(yǎng)基: | YPDA |
菌株類(lèi)別: | 酵母菌 |
培養(yǎng)條件: | 28℃，有氧，YPDA |
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化: | 電激 |
保存方式: | 30%甘油，-80℃ |
基本應(yīng)用: | 用于蛋白表達(dá) |
■ 使用方法
建議超凈臺(tái)內(nèi)劃線涂板，得到單克隆后再進(jìn)行其他實(shí)驗(yàn)操作，避免雜菌污染。
■ 注意事項(xiàng)
1. 酵母菌在YPD培養(yǎng)基上會(huì)變粉，是正常現(xiàn)象，可以由此特性鑒別是否為酵母菌。
2. 酵母菌種化凍1-2次活性下降，不建議直接長(zhǎng)期保存。
3. 活化保種的種管建議分裝保存，反復(fù)凍融菌株活力下降。
4. 本產(chǎn)品僅可用于實(shí)驗(yàn)室研究，不能用于動(dòng)物，人體以及作為食品添加劑等用途。
5. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
