■ 產(chǎn)品介紹
EPI400來(lái)源于EC100菌株,將EC100核基因中控制質(zhì)??截悢?shù)的pcnB基因刪除后引入一個(gè)誘導(dǎo)啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的pcnB基因,即是EPI400菌株。EPI400菌株可以顯著降低質(zhì)粒的拷貝數(shù),特別適合于各種不穩(wěn)定DNA或毒性基因的克隆,在加入WDEPI-誘導(dǎo)劑 I 后又可以提高質(zhì)粒產(chǎn)量到正常狀態(tài)(不穩(wěn)定的DNA序列高拷貝數(shù)通常為抑制細(xì)胞生長(zhǎng)或含有一個(gè)蛋白編碼AT-并具有較強(qiáng)的二級(jí)結(jié)構(gòu)富含GC序列或序列)。[mcrA,Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)]基因型使EPI400菌株適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA 。recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。lacZΔM15 標(biāo)記的存在使EPI400可用于藍(lán)白斑篩選,tonA賦予其抗噬菌體T1和T5的能力,rpsL賦予其鏈霉素抗性。 |
基因型: | F- mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697galU galK λ- rpsL (StrR) nupG trfA tonA pcnB4 dhfr |
■ 產(chǎn)品特點(diǎn)
· 維持克隆低拷貝數(shù),然后誘使為提高質(zhì)粒產(chǎn)量較高拷貝數(shù)。
· 高轉(zhuǎn)化效率與各種規(guī)模的克隆。
· 抗噬菌體T1和T5。
· lacZΔM15用于重組的藍(lán)/白篩選。
· [MCRA,Δ(MRR-hsdRMS-mcrBC)基因型使甲基化DNA的克隆效率。
· endA1以確保DNA的高產(chǎn)率。
· recA1用于大型克隆插入更大的穩(wěn)定性。
■ 適用范圍
不穩(wěn)定的DNA序列的克隆或表達(dá)毒性蛋白。
■ 使用方法
建議超凈臺(tái)內(nèi)劃線涂板,得到單克隆后再進(jìn)行其他實(shí)驗(yàn)操作,避免雜菌污染。
■ 注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅可用于實(shí)驗(yàn)室研究,不能用于動(dòng)物,人體以及作為食品添加劑等用途。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
3. 使用甘油菌時(shí)可不完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂布固體瓊脂平板即可,也可完全融解后使用,但隨著凍融次數(shù)的增加,菌株的活力會(huì)逐漸下降。