本公司生產(chǎn)的BL21-Gold(DE3)感受態(tài)細胞是采用特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞,可用于DNA的化學轉化。使用pUC19質(zhì)粒檢測,轉化效率高達107cfu/μg DNA以上。
基因型為:E. coli B F- ompT hsdS(rB- mB-)dcm+ Tetr gal λ (DE3) endA Hte
BL21-Gold(DE3)是BL21系列細胞的升級版,提升了轉化效率并且能夠產(chǎn)生高質(zhì)量的小提DNA。
BL21-Gold(DE3)是利用T7 RNA聚合酶啟動進行蛋白表達的載體的高效表達菌株。本宿主菌來源于E.coli B,缺乏Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶,能夠有效防止目標蛋白降解。
BL21-Gold(DE3)感受態(tài)細胞具有Hte表型,該表型增加了細胞的質(zhì)粒轉染效率。另外,菌株內(nèi)的endonuclease I (endA)編碼基因被失活了,而該蛋白酶(endA)能夠在大部分的質(zhì)粒小提時,快速降解質(zhì)粒DNA。這兩個菌株明顯特征,使得該菌株能夠直接用來擴增克隆蛋白表達構建質(zhì)粒。
由于在未使用IPTG進行誘導表達時,宿主菌內(nèi)仍然有少量T7 聚合酶合成,這能夠?qū)е律倭康哪康牡鞍缀铣?。如果目的蛋白是毒性蛋白的話,會抑制細菌生長,甚至導致細菌死亡。所以本菌株不適合表達對細菌有毒性或生長抑制的蛋白。