產品介紹
本產品以總RNA或miRNA為模板,先通過Poly(A)聚合酶在miRNA的3`端加多聚A尾,隨后使用Universal Oligo(dT) Primer進行逆轉錄反應,最終生成miRNA對應的cDNA第一鏈。
產品特點
操作簡單:在一管中即可同時完成加尾和逆轉錄。
特異性強:POLY(A)聚合酶特異性識別單鏈miRNA,最大限度降低miRNA前體的逆轉錄;逆轉錄引物設計為莖環(huán)結構,減少了PCR時的非特異性擴增。
逆轉錄效率高:逆轉錄酶無RNase H活性,具有更高的逆轉錄效率和靈敏度。
產品應用
以總RNA或miRNA為模板,進行加A尾法逆轉錄,產物用于RT-PCR、熒光定量PCR。
實驗案例
1、一步完成加尾和逆轉錄反應。

2、優(yōu)異的逆轉錄特異性
以水稻miRNA為模板,使用本產品與某T公司和某V公司同類產品進行反轉錄,得到的cDNA進行熒光定量檢測osa-miR156a??梢钥吹剑褂帽井a品得到的融解曲線為單峰,同類產品得到的融解曲線為雙峰。
3、優(yōu)異的靈敏度和穩(wěn)定性
使用本產品反轉錄小鼠肝miRNA,之后用熒光定量檢測hsa-miR-30a-3p。結果顯示,反轉錄產物的靈敏度和穩(wěn)定性均良好。
擴增曲線 | 融解曲線
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小鼠肝miRNA濃度:226ng/uL,取1 uL反轉錄(反轉錄體系:20 μL),將cDNA原液分別稀釋101-105,取2 μL 進行qPCR,q-PCR試劑:2×HQ SYBR qPCR Mix (Without ROX)熒光定量試劑(ZF501)。